现代社会随着人类生活水平的提高和生活压力的增大，血脂代谢相关疾病逐年增多，如何调控血脂在体内的代谢，从而改善疾病的发生、发展已成为目前医学界关注的重点领域。 　　脑硫苷脂是人类体内的一种正常脂类，它存在于肝脏、小肠、肾脏、心脏等多种组织和器官中，脑硫苷脂的代谢与多种病理生理现象存在密切关联。但科学界对于脑硫苷脂的研究受制于脑硫苷脂的检测分析方法的限制，以前只存在脑硫苷脂的化学及生物学检测方法，这些方法存在需要检测样本数量大、准确性低、检测时间长等缺点，无法应用于大量的临床试验研究。　　本研究组基于以上情况，力求开发出适用于临床检测研究的脑硫苷脂全新测定方法。利用此方法，进行脑硫苷脂与相关疾病的研究，从而探索脑硫苷脂的病理生理机能。 　　本课题起始于2007年，截止于2009年。第一阶段主要是脑硫苷脂全新测定方法的开发，我们开发出了能同时对大量样本脑硫苷脂进行定质、定量分析的方法。此方法具体操作简要介绍如下： 　　（1）硫脑苷脂的提取： 　　a.取患者50微升血清加入Hexane(正己烷)：isopropanol（异丙醇）(3:2)组成的混合溶液中分离提纯血清硫脑苷脂。 　　b.利用离心蒸发干燥机蒸干提纯的血清硫脑苷脂，加入0.1N氢氧化钠300微升于150摄氏度恒温箱中皂化十分钟，切断血清硫脑苷脂的脂肪酸长链，使之变成氢化硫脑苷脂。 　　c.利用高精度单头滤过装置（MonoTip C18）洗脱其他脂类，提纯氢化硫脑苷脂。 　　d.用Methanol(甲醇)溶解高精度单头滤过装置中提纯的氢化硫脑苷脂并加入固定量的羟化硫脑苷脂，并将其收集试管中进行干燥。 　　（2）利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪进行氢化硫脑苷脂质与量的分析：我们用alpha-cyano-4-hydroxycinnamic acid:水（1:1）配置成的溶解液3微升溶解干燥的氢化硫脑苷脂，将混合溶液置于样本分析盘中，干燥后放入基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪的激光发射口处。把基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪的激光光束调整为氮离子光（337nm），采用阴离子模板作为反射模板。以标准的氢化硫脑苷脂d18:1([M-H]-,540.2843) 和羟化硫脑苷脂d18:0([M-H]-,584.3105)校准测定仪。采用每秒50次的激光离子化样本，在解离图谱中测定氢化硫脑苷脂和固定量的羟化硫脑苷脂的离子含量比值，从而测定出样本中硫脑苷脂的质与量。此方法开创了脑硫苷脂分析测定的生物化学时代，所以其研究成果在世界上处于领先水平。 　　第二阶段是探索脑硫苷脂的代谢途径及与相关心血管病的关联。利用上述方法，我们准确的发现了心血管病的高危人群－末期肾病病人的血清脑硫苷脂质与量的变化，推测出血清脑硫苷脂与人类心血管疾病可能存在的紧密关联，从而提出了血清脑硫苷脂可能为影响人类心血管病发生、发展的一种新的生物标记物。为进一步证实血清脑硫苷脂与人类心血管病发生、发展的相关性。我们又探索了心血管病的高危人群-末期肾病病人血清脑硫苷脂减低的原因：我们以过量白蛋白注入小鼠体内导致肾病作为人类末期肾病的模型，对比肾病组小鼠和健康组小鼠中血清、肝脏、小肠、肾脏脑硫苷脂的浓度。 　　结果发现随着肾病的进展血清脑硫苷脂的含量进行性减少，而且肝脏、小肠中脑硫苷脂含量也平行性减少。只有肾脏中脑硫苷脂含量增高。从以上事实中，我们推测出肾病时肝脏、小肠中脑硫苷脂合成减少导致了释放入血清的脑硫苷脂减少。随着血清脑硫苷脂的减少引起脑硫苷脂所具有的抗凝作用减弱，导致了体内抗凝、促凝平衡遭到破坏，引起了血栓形成的增多，从而可能导致了凝血相关的心血管病形成。 　　我们以上的研究成果根源于临床实际，能够服务于临床工作的需求，很可能为心血管疾病的防治提供新的手段和方法。具有广范的应用前景。

　　现代社会随着人类生活水平的提高和生活压力的增大，血脂代谢相关疾病逐年增多，如何调控血脂在体内的代谢，从而改善疾病的发生、发展已成为目前医学界关注的重点领域。 　　脑硫苷脂是人类体内的一种正常脂类，它存在于肝脏、小肠、肾脏、心脏等多种组织和器官中，脑硫苷脂的代谢与多种病理生理现象存在密切关联。但科学界对于脑硫苷脂的研究受制于脑硫苷脂的检测分析方法的限制，以前只存在脑硫苷脂的化学及生物学检测方法，这些方法存在需要检测样本数量大、准确性低、检测时间长等缺点，无法应用于大量的临床试验研究。　　本研究组基于以上情况，力求开发出适用于临床检测研究的脑硫苷脂全新测定方法。利用此方法，进行脑硫苷脂与相关疾病的研究，从而探索脑硫苷脂的病理生理机能。 　　本课题起始于2007年，截止于2009年。第一阶段主要是脑硫苷脂全新测定方法的开发，我们开发出了能同时对大量样本脑硫苷脂进行定质、定量分析的方法。此方法具体操作简要介绍如下： 　　（1）硫脑苷脂的提取： 　　a.取患者50微升血清加入Hexane(正己烷)：isopropanol（异丙醇）(3:2)组成的混合溶液中分离提纯血清硫脑苷脂。 　　b.利用离心蒸发干燥机蒸干提纯的血清硫脑苷脂，加入0.1N氢氧化钠300微升于150摄氏度恒温箱中皂化十分钟，切断血清硫脑苷脂的脂肪酸长链，使之变成氢化硫脑苷脂。 　　c.利用高精度单头滤过装置（MonoTip C18）洗脱其他脂类，提纯氢化硫脑苷脂。 　　d.用Methanol(甲醇)溶解高精度单头滤过装置中提纯的氢化硫脑苷脂并加入固定量的羟化硫脑苷脂，并将其收集试管中进行干燥。 　　（2）利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪进行氢化硫脑苷脂质与量的分析：我们用alpha-cyano-4-hydroxycinnamic acid:水（1:1）配置成的溶解液3微升溶解干燥的氢化硫脑苷脂，将混合溶液置于样本分析盘中，干燥后放入基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪的激光发射口处。把基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪的激光光束调整为氮离子光（337nm），采用阴离子模板作为反射模板。以标准的氢化硫脑苷脂d18:1([M-H]-,540.2843) 和羟化硫脑苷脂d18:0([M-H]-,584.3105)校准测定仪。采用每秒50次的激光离子化样本，在解离图谱中测定氢化硫脑苷脂和固定量的羟化硫脑苷脂的离子含量比值，从而测定出样本中硫脑苷脂的质与量。此方法开创了脑硫苷脂分析测定的生物化学时代，所以其研究成果在世界上处于领先水平。 　　第二阶段是探索脑硫苷脂的代谢途径及与相关心血管病的关联。利用上述方法，我们准确的发现了心血管病的高危人群－末期肾病病人的血清脑硫苷脂质与量的变化，推测出血清脑硫苷脂与人类心血管疾病可能存在的紧密关联，从而提出了血清脑硫苷脂可能为影响人类心血管病发生、发展的一种新的生物标记物。为进一步证实血清脑硫苷脂与人类心血管病发生、发展的相关性。我们又探索了心血管病的高危人群-末期肾病病人血清脑硫苷脂减低的原因：我们以过量白蛋白注入小鼠体内导致肾病作为人类末期肾病的模型，对比肾病组小鼠和健康组小鼠中血清、肝脏、小肠、肾脏脑硫苷脂的浓度。 　　结果发现随着肾病的进展血清脑硫苷脂的含量进行性减少，而且肝脏、小肠中脑硫苷脂含量也平行性减少。只有肾脏中脑硫苷脂含量增高。从以上事实中，我们推测出肾病时肝脏、小肠中脑硫苷脂合成减少导致了释放入血清的脑硫苷脂减少。随着血清脑硫苷脂的减少引起脑硫苷脂所具有的抗凝作用减弱，导致了体内抗凝、促凝平衡遭到破坏，引起了血栓形成的增多，从而可能导致了凝血相关的心血管病形成。 　　我们以上的研究成果根源于临床实际，能够服务于临床工作的需求，很可能为心血管疾病的防治提供新的手段和方法。具有广范的应用前景。