本课题选择了沙门氏菌invA基因、副溶血性弧菌toxR基因和大肠杆菌O157：H7 RFBE基因的保守序列，设计引物和探针，通过优化反应体系和参数，建立了可同时检测上述三种致病菌的多重实时荧光PCR方法。该方法具有快速、特异、灵敏、经济、可重复的优点，可在8小时内完成对水产品上述三种致病菌的检测。该方法对纯菌的检测灵敏度均低于10cfu/PCR反应体系。人工染菌样品经过6h增菌，检测低限可达10cfu/25g；对48株标准和参考菌株的特异性检测，结果只有对应的24株目标菌出现阳性反应；重复性试验结果，定量检测批内和批间的CP值变异系数均小于2％。 应用本课题所建立的多重荧光PCR检测方法检测水产品样品，其结果与SN方法和单重荧光PCR方法的检测结果一致，但检测时间只有SN方法的1/10，检测成本比单重荧光PCR方法节省50％以上，减少工作量1/2以上。 评审专家认为该课题的研究成果达到了国内领先水平，所建立的方法有利于进出口水产品的快速检验检疫和快速通关，具有良好的推广应用前景。

本课题选择了沙门氏菌invA基因、副溶血性弧菌toxR基因和大肠杆菌O157：H7 RFBE基因的保守序列，设计引物和探针，通过优化反应体系和参数，建立了可同时检测上述三种致病菌的多重实时荧光PCR方法。该方法具有快速、特异、灵敏、经济、可重复的优点，可在8小时内完成对水产品上述三种致病菌的检测。该方法对纯菌的检测灵敏度均低于10cfu/PCR反应体系。人工染菌样品经过6h增菌，检测低限可达10cfu/25g；对48株标准和参考菌株的特异性检测，结果只有对应的24株目标菌出现阳性反应；重复性试验结果，定量检测批内和批间的CP值变异系数均小于2％。 应用本课题所建立的多重荧光PCR检测方法检测水产品样品，其结果与SN方法和单重荧光PCR方法的检测结果一致，但检测时间只有SN方法的1/10，检测成本比单重荧光PCR方法节省50％以上，减少工作量1/2以上。 评审专家认为该课题的研究成果达到了国内领先水平，所建立的方法有利于进出口水产品的快速检验检疫和快速通关，具有良好的推广应用前景。