Taqman MGB探针是在Taqman探针基础上提出的一种新型分子探针，它的荧光淬灭基团是一种基本无荧光本底的小沟结合物，降低了本底，可以用较短的探针达到更好地分辨效果，增加了对指定目标检测的可靠性，可以更好的实现多重实时PCR检测多种致病菌。Taqman MGB探针荧光PCR技术除了拥有Taqman探针PCR方法的所有优点外，还有以下优势： ①可以使探针的长度缩短，尤其对AT含量高的序列的MGB探针的设计有很大的帮助； ②提高配对与非配对模板间的Tm值差异； ③由于在探针的3|端的淬灭集团为不发光的荧光基团，并且与报告基团在空间的位置更接近，使杂交的稳定性大大提高，实验的结果更精确，分辨率更高； ④新探针实验优化步骤简单，杂交的重复性大大提高。 在研究中我们发现，影响实时荧光PCR检测特异性和灵敏度的因素很多，首先必须保证设计的引物和探针具有良好的特异性；其次，进行多重PCR时，添加的模板的量不能太多，否则，高浓度的DNA会抑制PCR反应，所以进行多重PCR时，建议使用每种提取液的10～1倍稀释液进行实验；最后，应选用高品质的PCR反应试剂，可以提高反应的灵敏度、特异性和重复性。 本研究的研制成功及推广应用对提高进出口水产品中此三种菌的检测效率、降低检测成本和提升我国进出口水产品检验检疫水平都具有十分重要的意义。同时，所建立的方法还可以应用于食品中此三种菌的监测和快速检测，具有巨大的经济和社会效益。

Taqman MGB探针是在Taqman探针基础上提出的一种新型分子探针，它的荧光淬灭基团是一种基本无荧光本底的小沟结合物，降低了本底，可以用较短的探针达到更好地分辨效果，增加了对指定目标检测的可靠性，可以更好的实现多重实时PCR检测多种致病菌。Taqman MGB探针荧光PCR技术除了拥有Taqman探针PCR方法的所有优点外，还有以下优势： ①可以使探针的长度缩短，尤其对AT含量高的序列的MGB探针的设计有很大的帮助； ②提高配对与非配对模板间的Tm值差异； ③由于在探针的3|端的淬灭集团为不发光的荧光基团，并且与报告基团在空间的位置更接近，使杂交的稳定性大大提高，实验的结果更精确，分辨率更高； ④新探针实验优化步骤简单，杂交的重复性大大提高。 在研究中我们发现，影响实时荧光PCR检测特异性和灵敏度的因素很多，首先必须保证设计的引物和探针具有良好的特异性；其次，进行多重PCR时，添加的模板的量不能太多，否则，高浓度的DNA会抑制PCR反应，所以进行多重PCR时，建议使用每种提取液的10～1倍稀释液进行实验；最后，应选用高品质的PCR反应试剂，可以提高反应的灵敏度、特异性和重复性。 本研究的研制成功及推广应用对提高进出口水产品中此三种菌的检测效率、降低检测成本和提升我国进出口水产品检验检疫水平都具有十分重要的意义。同时，所建立的方法还可以应用于食品中此三种菌的监测和快速检测，具有巨大的经济和社会效益。