一种鸡MDA5基因启动子及其应用

成果基本信息
关键词：	启动子;表达;种鸡
成果类别：		技术成熟度：
体现形式（基础理论类）：		体现形式（应用技术类）：	无
成果登记号：	201814611	资源采集日期：	2019-04-15

研究情况
单位名称：	广西大学	技术水平：
评价证书号：		评价单位：	国家知识产权局
评价日期：	2018.01.19	评价证书号：

转化情况
转让范围：		推广形式：	无
已转让企业数（个）：	0

联系方式
联系人（平台）：	玉女士	联系人（平台）电话：	0771-5885053
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成果简介
家禽，尤其是鸡，作为人类最重要的肉类食品来源之一，其工业化生产在当今社会经济中处于重要地位。然而，由于培育优良品种和提高产量的压力，家禽对很多疾病变得更加敏感。这往往给养鸡产业造成巨大的经济损失，阻碍其盈利和发展。更重要的是，家禽对相当大范围的细菌、真菌、原生动物和病毒等病原体高度易感，使其成为向人类传播疾病的一类重要的病原体来源，危害着人类的健康。免疫系统是动物赖以抵抗入侵病原体的防御机制，可分为天然免疫和适应性免疫。黑素瘤差异化相关基因5(MDA5)是视黄酸诱导型基因I（RIG-I）样受体（RLR）家族的成员，并且在抗病毒先天免疫反应中起关键作用。RIG-I在鸡的基因组中是缺失的，这可能是相对于表达RIG-I基因的鸭和其他哺乳动物，鸡对某些特定的病原体更易感的原因。因此，在鸡上，MDA5对细胞质中的RNA病毒的识别及抗病毒天然免疫反应的触发显得尤为重要。但是，目前鸡MDA5基因的相关研究还较少，其表达的分子调控机制尚未明确。在本研究成果中，我们成功克隆得到鸡MDA5全长启动子序列，构建了此启动子报告载体质粒piggybac-MDA5-DsRed，并以此载体转染DF-1得到稳定转染此质粒的细胞系。在此细胞系中，DsRed的表达情况代表着MDA5启动子的活性。在正常生理条件下，表达DsRed的细胞非常少，几乎为零，表明MDA5启动子的活性极低；当细胞受到长链poly(I：C)(>1 kb)和短链poly(I：C)(<1 kb)、干扰素-β(Interferonβ，IFN-β)和鸡传染性法氏囊病毒的刺激(Infectious bursaldisease vires，IBDV)时，表达DsRed的细胞数量显著上升，说明MDA5启动子的活性被极大地激活了。然而，传染性支气管炎病毒（IBV）和新城疫病毒（NDV）未能增加MDA5启动子活性和内源性MDA5的表达。结果表明克隆出的启动子活性与内源性MDA5的表达是一致的，此项研究首次得到了检测鸡MDA5表达和调节的工具。我们的研究成果首次成功克隆出了鸡MDA5启动子并对其功能进行了初步研究。本研究的结果表明，此启动子与得到的Piggybac-MDA5一DsRed细胞系可以用来检测鸡MDA5的配体，验证其能否调节内源性MDA5基因的表达。本研究对鸡天然免疫系统中的重要模式识别受体MDA5的启动子进行初步探索，将为针对鸡MDA5基因表达调控机制的研究提供理论依据，有利于完善人们对鸡天然免疫系统的认知。

成果名称：	一种鸡MDA5基因启动子及其应用	关键词：	启动子;表达;种鸡
成果类别：		一级分类名称：	畜牧、动物医学
二级分类名称：	野生动物驯养	三级分类名称：
研究起止时间：	2012.01 至2018.01	成果体现形式（应用技术类）：	无
成果属性：		成果体现形式（基础理论类）：
技术成熟度：		技术水平：
研究形式：		学科分类1：
单位名称：	广西大学	学科分类2：
中图分类号1：		所属高新技术类别：
中图分类号2：		课题来源：
应用行业：		课题立项名称：
国家科技计划子类别：		课题立项编号：	桂科合1347004-6
经费实际投入额（万元）：	40.00	评价单位：	国家知识产权局
评价形式：	无	应用状态：	无
评价日期：	2018.01.19	转让范围：
评价证书号：		推荐单位：	广西壮族自治区教育厅
推广形式：	无	成果登记号：	201814611
成果简介：	家禽，尤其是鸡，作为人类最重要的肉类食品来源之一，其工业化生产在当今社会经济中处于重要地位。然而，由于培育优良品种和提高产量的压力，家禽对很多疾病变得更加敏感。这往往给养鸡产业造成巨大的经济损失，阻碍其盈利和发展。更重要的是，家禽对相当大范围的细菌、真菌、原生动物和病毒等病原体高度易感，使其成为向人类传播疾病的一类重要的病原体来源，危害着人类的健康。免疫系统是动物赖以抵抗入侵病原体的防御机制，可分为天然免疫和适应性免疫。黑素瘤差异化相关基因5(MDA5)是视黄酸诱导型基因I（RIG-I）样受体（RLR）家族的成员，并且在抗病毒先天免疫反应中起关键作用。RIG-I在鸡的基因组中是缺失的，这可能是相对于表达RIG-I基因的鸭和其他哺乳动物，鸡对某些特定的病原体更易感的原因。因此，在鸡上，MDA5对细胞质中的RNA病毒的识别及抗病毒天然免疫反应的触发显得尤为重要。但是，目前鸡MDA5基因的相关研究还较少，其表达的分子调控机制尚未明确。在本研究成果中，我们成功克隆得到鸡MDA5全长启动子序列，构建了此启动子报告载体质粒piggybac-MDA5-DsRed，并以此载体转染DF-1得到稳定转染此质粒的细胞系。在此细胞系中，DsRed的表达情况代表着MDA5启动子的活性。在正常生理条件下，表达DsRed的细胞非常少，几乎为零，表明MDA5启动子的活性极低；当细胞受到长链poly(I：C)(>1 kb)和短链poly(I：C)(<1 kb)、干扰素-β(Interferonβ，IFN-β)和鸡传染性法氏囊病毒的刺激(Infectious bursaldisease vires，IBDV)时，表达DsRed的细胞数量显著上升，说明MDA5启动子的活性被极大地激活了。然而，传染性支气管炎病毒（IBV）和新城疫病毒（NDV）未能增加MDA5启动子活性和内源性MDA5的表达。结果表明克隆出的启动子活性与内源性MDA5的表达是一致的，此项研究首次得到了检测鸡MDA5表达和调节的工具。我们的研究成果首次成功克隆出了鸡MDA5启动子并对其功能进行了初步研究。本研究的结果表明，此启动子与得到的Piggybac-MDA5一DsRed细胞系可以用来检测鸡MDA5的配体，验证其能否调节内源性MDA5基因的表达。本研究对鸡天然免疫系统中的重要模式识别受体MDA5的启动子进行初步探索，将为针对鸡MDA5基因表达调控机制的研究提供理论依据，有利于完善人们对鸡天然免疫系统的认知。
联系人：	韦汉西	成果登记日期：	2018-05-02
联系人email：		单位代码：	94500003
邮政编码222：	530004	联系人电话：	0771-3272191
单位传真：	0771-3234977	单位通讯地址：	广西壮族自治区南宁市城北区大学路100号
单位所在省市：		单位电话：	0771-3236624
转让收入（万元）：	0	单位属性：
合作完成单位：		已转让企业数（个）：	0
成果发布年份：	2018	知识产权形式：
成果完成人：	陆阳清;张文馨;陈东阳;左二伟;卢克焕	资源采集日期：	2019-04-15

一种鸡MDA5基因启动子及其应用

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